包虫IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）说明书
【产品名称】
通用名称：包虫IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
【包装规格】 
48人份／盒，96人份／盒
【预期用途】
本试剂盒用于体外定性检测人血清样品中的包虫IgG抗体。
本品系用包虫抗原包被的微孔板和酶标记抗人IgG单克隆抗体及其他试剂制成，用于包虫病的临床辅助诊断。
包虫病是棘球蚴病（Echinococosis）的俗称，是由棘球绦虫的幼虫寄生于人体引起的一种人兽共患寄生虫病。引起包虫病的病原主要有：细粒棘球绦虫的幼虫引起囊型包虫病；多房棘球绦虫的幼虫引起泡型包虫病。家犬和狼、豺、狐等食肉动物是棘球蚴绦虫的传染源，但家犬是主要传染源。作为终宿主的家犬排出成熟节片及大量虫卵时，污染草地、水源、家居环境，食草动物和人均因食入虫卵而被感染。包虫病患者早期可无任何临床症状，多在体检中被发现。主要的临床表现为棘球蚴囊占位所致压迫、刺激、或破裂引起的一系列症状。包虫病可发生在全身多个脏器，以肝、肺多见，泡型包虫病对脏器的危害大于囊型包虫病，因其可通过外生性增殖向周围组织浸润、扩散，也可通过淋巴或血液扩散到其它脏器，犹如恶性肿瘤，就诊病人多属晚期。
包虫病患者的血清中含有特异性包虫IgG抗体或循环抗原或免疫复合物，检测人血清样品中的包虫IgG抗体，可用于包虫病的辅助诊断。
【检验原理】
酶联免疫间接法原理：用包虫抗原包被微孔板，加待检者血清到板孔中，包虫IgG抗体特异性地与微孔板表面的包虫抗原结合，形成抗原抗体免疫复合物。洗板，除去多余物质后，加入抗人IgG抗体酶标记物，形成（抗原－抗体－二抗酶标记物）免疫复合物。洗板，除去多余的结合物，加入显色液，在酶作用下产生颜色反应，通过酶标仪测定显色反应的强弱即可定性检测待检样品中的包虫IgG抗体。
【主要组成成分】
1. 本试剂盒包含的组份
序号 组份名称 主要成分 使用方法 装量
    96人份／盒 48人份／盒
1 预包被包虫抗原的微孔板 微孔板中预包被包虫天然抗原。 可拆成单孔，直接使用 96孔 48孔
2 抗人IgG抗体酶标记物 辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗人IgG单克隆抗体（来源于小鼠）；硼酸盐缓冲液，含防腐剂、稳定剂。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
3 包虫IgG抗体阳性对照 包虫IgG阳性人血清；硼酸缓冲液，含0.02%硫柳汞、稳定剂。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
4 包虫IgG抗体阴性对照 包虫IgG阴性人血清；硼酸缓冲液，含0.02%硫柳汞、稳定剂。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
5 包虫IgG抗体临界对照 包虫IgG阳性人血清；硼酸缓冲液，含0.02%硫柳汞、稳定剂。 直接使用 1.8mL×1支 1.8mL×1支
6 显色液A 柠檬酸、过氧化氢。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
7 显色液B 柠檬酸、四甲基联苯胺（TMB）。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
8 浓缩洗涤液 磷酸盐缓冲液，含0.5%Tween-20，10倍浓缩。 用蒸馏水或去离子水10倍稀释后使用 50mL×1瓶 50mL×1瓶
9 样品稀释液（IgG） 硼酸盐缓冲液，甘油。 直接使用 50mL×2瓶 50mL×1瓶
10 终止液 0.5 mol/L H2SO4溶液。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
11 密封袋   1个 1个
12 封板膜   4片 4片
13 记录纸   1份 1份
注：酶标记物、阳性对照、阴性对照、临界对照，必须使用试剂盒配备的，不能使用其它批号产品。显色液A、显色液B、终止液、浓缩洗涤液为通用试剂，可用于本公司所有ELISA试剂盒。
2. 需要但未提供的材料：
微孔板清洗器
(5～40)μL、(40～200)μL、200μL～1mL移液器
37℃恒温设备
微孔振荡器
【储存条件及有效期】
于2℃～8℃避光保存，有效期为12个月。生产日期及失效日期见标签。
拆封后未用完的微孔板应放入密封袋内2℃～8℃保存。各组份拆封后应在一个月内用完。
【适用仪器】
具有450nm、630nm波长的酶标仪
【样品要求】
应按照临床采血技术规范操作采集血清。室温保存样品不要超过8小时；若实验在8小时以后进行，需将样品保存在2℃～8℃；如保存超过1周则保存在-20℃以下，并尽量避免反复冻融，冻融次数不宜超过5次。尽管胆红素、血红蛋白、甘油三酯对本试剂盒检测结果无显著干扰，仍应避免使用黄疸、溶血或高血脂样品。明显被污染的样品不能用于检测。
【检验方法】
1.  试验过程注意事项
1.1  试剂盒各组份从冷藏环境中取出时，应在室温（20℃～25℃）平衡至无潮气方可使用。拆封后未用完的包被板应放入密封袋内保存。
1.2  在储存及温育过程中，应避免强光直接照射。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染。
1.3  为避免试剂或样品的微生物污染及交叉污染，应使用一次性吸嘴，不要重复使用。
1.4  在取用对照品和酶标记物之前应轻轻摇动使其充分混匀，加样前，使用微孔振荡器充分混匀稀释过的样品。
1.5  严格遵守规定的温育时间和温度。如果第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔太长，将会导致不同的“预温育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
1.6  洗涤结束时，应将微孔板倒扣于纸巾上并轻轻敲打，以确保所有孔内均无洗涤缓冲液，避免产生泡沫。如果使用自动洗板机，应注意正确操作。
2.  试验准备
2.1  试剂盒反应试剂准备
2.1.1  微孔条
将检测所需数量的微孔条固定于板架上，剩余的微孔条放入密封袋中保存。
2.1.2  洗涤液
在干净的量筒内稀释浓缩洗涤液。50mL浓缩洗涤液加入蒸馏水或去离子水至500mL，混匀。
2.1.3  其它液体组份
直接使用，使用前应轻轻摇动使其充分混匀。
2.2  样品准备
样品1:100稀释：取10L待检样品，加入至含有1mL样品稀释液（IgG）的小试管内，充分混匀。
3．  检测过程
3.1  每次实验每板须设空白孔（若以双波长检测不设空白孔）、阳性对照、阴性对照各1孔，临界对照3孔。空白孔不加样品和酶标记物，只加洗液、显色液A、显色液B和终止液；阳性对照、阴性对照、临界对照直接使用，100L/孔。其余每孔加入稀释后样品100L。置37℃±1℃温育30分钟。
3.2  甩净孔中液体，将洗液注满每孔（约300μL/孔）后，甩净拍干，反复3次。除空白孔外每孔加酶标记物50μL，置37℃±1℃温育30分钟。
3.3  甩净孔中液体，同上洗板3次，拍干后各孔加显色液A、显色液B各50μL，置37℃±1℃避光15分钟，每孔加入终止液50μL，轻微震荡微孔板以混合均匀。
3.4  单波长检测：以空白孔调零，用酶标仪读取450nm处的A值；
双波长检测：用酶标仪读取450nm和630nm处的A值，以A450nm－A630nm计算A值。
4.  参考范围
阴性对照A值≤0.15，0.20≤临界对照A值平均值≤0.80，临界对照A值平均值／阴性对照A值平均值≥2.0，阳性对照A值＞临界对照A值平均值，证明实验成立，否则试验结果无效，需重新试验。
5.  结果判定
计算S/CO值，S/CO=样品A值／临界对照A值平均值。
反应性（R）：S/CO≥1.1
可疑（S）：0.9＜S/CO＜1.1
阴性（N）：S/CO≤0.9
【检验结果的解释】
1.  结果为反应性提示包虫感染，对反应性或可疑结果建议进行影像学检查。 
2.  检测结果仅供临床参考，临床医生应结合病史、症状及影像学检测结果做出诊断。
【检验方法的局限性】
1.  样品或试剂被微生物污染以及试剂的交叉污染可能导致错误结果。
2.  研究显示本品与弓形虫、肺吸虫、旋毛虫、血吸虫IgG抗体阳性血清无交叉反应；与部分囊虫IgG抗体阳性血清有交叉反应，应结合病史、症状、影像学检测结果及流行病学调查加以甄别；与其它病原体的交叉反应尚无实验数据。
【产品性能指标】
1.  灵敏度、特异性
本品检测1080例包虫病流行区和非流行区人群样本，与影像学检测比较，其灵敏度为91.0%，特异度为94.7%。
2.  精密性
批内变异系数CV（%）不高于15%（n＝10）。
3.  交叉反应
与弓形虫、肺吸虫、旋毛虫、血吸虫等病原体的IgG抗体阳性血清未发现交叉反应；与部分囊虫IgG抗体阳性血清有交叉反应。
与甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒HIV（1/2型）阳性血清、肝癌患者、肝囊肿患者、细菌性肝脓肿患者、胆囊积液患者、肺结核患者血清无交叉反应。
4.  内源性物质干扰试验
样品中胆红素0.1~0.4 mg/mL、血红蛋白5~50 mg/mL、甘油三酯2~8 mg/mL浓度范围内对本品检测结果无显著干扰。
5.  对国家参考品检测能力
本品检测国家参考品（230029-201001），8份阴性参考品检测结果全部为阴性；8份阳性参考品检测结果全部为阳性；精密性≤15％（n=10）；最低检出量不高于1：16，均符合国家参考品标准规定。
【注意事项】
1.  本品仅用于体外诊断，一次性使用。
2.  用于制备本品阴性对照、阳性对照、临界对照的血清已经HBsAg、HCV抗体、梅毒螺旋体抗体和HIV抗体检测为阴性，试剂盒内其它各种组份均无生物传染性。由于不能保证检测各组份所有的传染性因素，因此本品应作为具有潜在的传染性材料对待，所有接触试剂盒的人员应按实验室规范要求进行操作。
3.  任何临床样品都应作为具有传染性样品对待。
4.  待检样品及其他潜在感染材料试验后应予以消毒。
5.  注意避免皮肤或黏膜直接接触试剂或样品。显色液中含TMB，终止液含硫酸。含TMB的试剂在试验中会诱发其它反应；含硫酸的试剂有腐蚀性。一旦接触到这些液体，应立即用水彻底清洗。
【标识的解释】
包装标签
的标识    
标识的含义 温度限制 体外诊断医疗器械 参考使用说明 不得二次使用
【参考文献】
 [1] 中华人民共和国卫生行业标准（WS257-2006）“包虫病诊断标准”。
【基本信息】
注册人/生产企业名称：珠海经济特区海泰生物制药有限公司
住所：珠海市唐家湾镇港湾大道创新四路18号     
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生产地址：珠海市唐家湾镇港湾大道创新四路18号     
生产许可证编号： 
【医疗器械注册证编号/产品技术要求编号】
【说明书核准及修改日期】